技術(shù)文章
新聞資訊
INFORMATION CENTER
消毒劑細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)方法步驟
  • 56次
  • 2025-03-19

　　消毒劑細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)，又稱Ames試驗(yàn)，是一種用于檢測(cè)消毒劑是否具有致突變性的體外毒理學(xué)測(cè)試方法。該試驗(yàn)通過(guò)觀察受試物能否引起特定突變菌株的基因回復(fù)突變，從而評(píng)估其潛在的遺傳毒性?。


　　細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)利用營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株（如鼠傷寒沙門(mén)氏菌或大腸桿菌）檢測(cè)受試物是否引起基因突變。這些菌株在特定基因上發(fā)生突變，無(wú)法合成某些必需氨基酸（如組氨酸或色氨酸），因此只能在含有這些氨基酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。當(dāng)受試物引起回復(fù)突變時(shí)，菌株重新獲得合成能力，可在無(wú)氨基酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)并形成可見(jiàn)菌落，從而評(píng)估受試物的致突變性?。


細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)


　　消毒劑細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)方法步驟


　?。?）試驗(yàn)步驟


　　?菌株準(zhǔn)備?：將菌株接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，37℃振蕩培養(yǎng)10小時(shí)或靜置培養(yǎng)16小時(shí)，使活菌數(shù)達(dá)到1×10?/mL～2×10?/mL?。


　　?培養(yǎng)基制備?：底層培養(yǎng)基倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中，靜置凝固。頂層培養(yǎng)基融化后分裝于無(wú)菌試管，每管2mL，45℃水浴保溫?。


　　?受試物處理?：在保溫的頂層培養(yǎng)基中依次加入菌液和受試物（需活化時(shí)加入10%S9混合液），混勻后迅速傾倒在底層培養(yǎng)基上，靜置凝固?。


　　?培養(yǎng)與觀察?：將培養(yǎng)皿放入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，觀察并計(jì)數(shù)回復(fù)突變菌落數(shù)量。必要時(shí)延長(zhǎng)至72小時(shí)?。


　　（2）試驗(yàn)方法


　　?平板摻入法?：將受試物與菌液混合后直接加入頂層培養(yǎng)基，傾倒在底層培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后觀察菌落?。


　　?點(diǎn)試法?：在頂層培養(yǎng)基上放置無(wú)菌濾紙片，滴加受試物或?qū)⒐腆w受試物結(jié)晶置于紙片或瓊脂表面，培養(yǎng)后觀察菌落?。


　　?預(yù)培養(yǎng)法?：將受試物與菌液在37℃預(yù)培養(yǎng)20分鐘或30℃預(yù)培養(yǎng)30分鐘，再加入頂層培養(yǎng)基，后續(xù)步驟同平板摻入法?。


　　（3）結(jié)果判定


　　?陽(yáng)性結(jié)果?：回復(fù)突變菌落數(shù)為陰性對(duì)照的兩倍以上，且具有劑量-反應(yīng)關(guān)系，表明受試物具有致突變性?。


　　?陰性結(jié)果?：回復(fù)突變菌落數(shù)與陰性對(duì)照無(wú)顯著差異，表明受試物無(wú)致突變性?。


　?。?）注意事項(xiàng)


　　?試驗(yàn)條件?：試驗(yàn)需在嚴(yán)格控制的實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性?。


　　?倫理要求?：涉及動(dòng)物試驗(yàn)時(shí)，需遵守實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利原則，減少動(dòng)物痛苦?。


技術(shù)文章
technical article
發(fā)布時(shí)間
選擇相關(guān)時(shí)間
  • 2021
  • 2020
  • 2019
  • 2018
搜索
我們的服務(wù)
our services
做最具影響力的國(guó)際化
檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證服務(wù)機(jī)構(gòu)。
推薦資訊Related news
推薦服務(wù)Related service